原位分析，精准检测，质谱成像等领域，应时代之需火热发展。作为组学实验室不可或缺的TVNM，Q&A解惑篇的发布也势在必行。闲话少叙，我们往下看：
1.什么是TriVersaNanoMate多通道纳喷源
TriVersaNanoMate多通道纳喷源，是美国Advion公司于2002年初推出的基于多通道芯片技术的全自动纳升电喷雾离子源，也属新一代电喷雾质谱的多通道进样系统，特别适合药物及其代谢物、蛋白质、脂质、抗体、ADCs等样品的高通量分析、组学研究、药物研发、临床分析、精准医学、生物标志物发现与验证等等。
2.TriVersaNanoMate的功能是什么应用范围有哪些
五合一功能，简述为：
1）纳升注射分析（nanoinfusion）：全自动nanoESI离子化，无需清洗，可无人值守；连续分析达400个样品，无残留无交叉。应用于脂质组学、代谢组学、非共（non-covalent）作用、NativeMS、PTM、ADCs、Histone、IntactProtein，等等。
2）nanoLC-MS接口：无缝联接nanoLC与质谱，电流感应在线监测喷雾连贯性，可3秒自动移换喷雾针，实现全自动、无间断运行。应用于核心蛋白质组学及临床蛋白质组学。
4）实施液滴萃取表面分析（LESA）：通过吸取少量溶剂（1μL）对样品表面的指定位置进行微萃取，再行纳升注射分析，获取化合物的表面分布或轮廓信息。应用于组织切片实现小分子、蛋白、脂质等的无基质成像分布分析、材料表面分析、MALDI板再分析，等等。
以LESA模式对组织或TLC薄层板表面萃取分析
5）实施LESAPLUS：即通过吸取少量溶剂（1μL）对样品表面的指定位置进行微萃取后，萃取液再以六通阀引致微升柱或纳升柱分离和在线nanoLC-MS分析，实现复杂体系的组学或成像分析。
LESA-nanoLC/MS(LESAPLUS)
3.TVNM，LESA和LESAPLUS各代表什么？
TVNM即“TriVersaNanoMate”的缩写，多通道纳喷源；
LESA即液滴萃取表面分析（LiquidExtractionSurfaceAnalysis）；
LESAPLUS是在LESA基础上的最新升级，可通过微升MicroLC或纳升NanoLC随后在线对萃取液实行分离并实时质谱检测，对复杂体系、抗体分析、蛋白分析等添加新的第四维度的分离。
4.与常规电喷雾离子化（ESI）或常规LC-MS液质相比，TVNM的优势在哪里？
与常规ESI相比，TVNM有诸多无可比拟的优势，比如：
1)TVNM是基于纳升电喷雾（nanoESI）原理，在脱附、去溶剂、雾化和离子化效率等方面均明显优于ESI，如更耐盐、耐基质等等。
2)TVNM的喷雾流速（20-500nL/min）远低于常规液质LC/MS（几百μL/min到1mL/min），即使样品量只有几微升，仍可充分利用并拉长分析，发挥质谱潜能。
3)最长可实现数十分钟的持续喷雾，能充分利用所联接质谱的多种关联扫描或信号累加功能。常规LC/MS无法做到。
4)实现纳喷阵列！多至400个半导体工艺喷嘴，经四十道精密加工工艺制成的芯片，喷雾重现。
5.与传统的纳升电喷雾nanoESI及nanoLC-MS相比，TVNM的优势在哪里？
与传统的nanoESI（以及nanoLC-MS）相比，TVNM具有更多优势，比如：
1）TVNM的核心是硅基喷雾芯片，上面均匀分布着400个精密加工的喷嘴，加工过程的高度一致性使喷雾的重现性大大提高。而且喷嘴是一次性使用，确保零残留。
多通道喷嘴，高度重现
2)传统纳喷的电场位于喷针和质谱进样口之间，而TVNM以喷嘴做反电极（长度为55μm，传统喷针约5cm，~1000倍的长度差异！），在喷嘴内的溶液和喷嘴外壁之间形成极强且稳定的电场，强度远高于传统纳喷，显著提升离子化效率，尤其对高水含量和含缓冲液Buffer的抗体药及偶联物ADCs等的离子化效率极高，获取传统nanoESI难以实现的质谱信号。
3)全自动进样，无需人工干预。
4)高通量，每天可处理几百个样品，对组学如代谢、脂质、酶反应监测等等研究有特效。
4)喷雾不易中断（有独特的SpraySensing功能），稳定性高，显著提升数据质量和定量准确度。
5)在线同步馏分收集功能，对低丰度蛋白质、代谢物和脂质等非常有效。
6)液滴萃取表面分析，可以对脂质、次生代谢物、蛋白质、药物或代谢物进行分布轮廓分析。这些是nanoLC-MS无法实现的。
7)样品盘可设定低温至4℃保护生物样品及组织。
6.芯片上的喷嘴是怎么适应不同流量的？如何应对堵塞？
有三种不同内径的喷嘴供选择，分别是2.5μm（20-60nL/min）、4μm（60-250nL/min）和5μm（200-500nL/min）。工作站通过“喷雾电流感应”（spraysensing）功能自动识别喷嘴是否堵塞，一旦发生可在3秒内自动移至下一个喷嘴。
7.馏分收集是如何工作的？
计算机自动识别对应色谱峰的馏分部位，并在线启动nanoInfusion纳升注射分析；或保存后，后续进行离线分析。
8.LESA是如何工作的？
LESA首先用扫描仪将样品（动植物组织切片、中药、薄层板、干血斑等平面类样品）扫描成图片，然后通过鼠标
LESA:DrugProfiling器官切片药物分布
9.LESA能否用于成像研究？
可以。液滴萃取表面分析（LESA）通过精确定位采样点，用1μL左右的溶剂对样品表面进行微萃取，再对萃取液进行质谱分析，不涉及真空和基质的使用。LESA的空间分辨率通常为0.6~1mm，最新的LESAPLUS约400μm；LESAPLUS更通过microLC或nanoLC对基质和待测物进行进一步分离，提高了复杂体系的检测分辨能力。
10.LESA除了成像，还能做什么？
LESA检测小鼠的体内药物代谢分布
11.微生物检测是否能通过TVNM实现？
可以。一些近期发表的文献报道了通过LESA对单独/共培养的细菌和真菌中的蛋白质、抗生素、代谢产物和毒素进行原位分析。（详情来函）
12.如果初期没有订购LESA，仅购买了TVNM源，以后可以升级吗？
早期的三合一功能的TVNM源，可以升级为LESA及LESAPLUS。LESA是一项独立功能，即使前期没有，也不影响后期添加。
13.TVNM与质谱的兼容情况？
TVNM在主流质谱厂商，如Thermo、Agilent、SCIEX、Waters、Bruker、Shimadzu的轨道阱、QTOF、FT、三重四级杆、混联质谱等的各型质谱上均可安装。
14.TVNM适用的分子量范围是多少？
TVNM对有机小分子和蛋白等生物大分子均适用。据文献报道，通过NativeLESA-MS检测到的tetradecamericGroEL已达~800kDa（分子量达80万Da）。这一质量范围是其他nanoESI及nanoLC-MS或常规LC-MS技术极难实现的。
很多，如脂质组学、代谢组学、植物次生代谢、糖组学、PTM、核心蛋白质组学等。如广为人知的“鸟枪法脂质组学”（ShotgunLipidomics）即是以TVNM为重要的基础技术支撑。
LESA直接分析植物根系，研究发育过程
16.动物如小鼠全身冷切片可以行使LESA无基质成像吗？组织会融化变质吗？
可以。（1）行使全身冷切成像；（2）组织不会融化变质。动物体如小鼠全身冷切片，放置在LESA载样板上，载样板或样品盘的温度可以保持在低温如4℃，配合LESA进程，避免出现过热或（像其他质谱成像技术那样容易发生的）组织表面因融化引起的凹凸不均质的现象发生，保障成像分析稳定重现。
17.LESA无基质成像可以定量吗？如何实现的？
LESA可以做到（1）相对定量成像；（2）绝对定量成像。外标法可判定药物（及代谢产物）在不同部位的相对浓度水平，做到相对定量；有的研究组利用喷涂仪，均匀喷涂内标，获取不同部位的（药物/内标）浓度比，相对定量；最近有学者开始尝试内标（如同位素内标）添加至组织后匀浆再冷冻及切片，和非匀浆法比对，验证绝对定量方法可行性。
18.LESA能否用于环境比如PM2.5的研究？
可以。已经见报诸多LESA用于环境毒理学研究的成果。某个研究组利用LESA实现了PM2.5颗粒物胶带的灵敏分析，剖析了颗粒物的化学组成。详情请来函索取。
19.TVNM目前的应用情况如何？
TVNM多通道纳喷源技术已经在800多个全球顶尖的实验室安装使用，这些实验室包括美国NIH等政府实验室；知名大学和研究机构如FTMS质谱发明人AlanG.Marshall实验室、Max-Plank研究所、脂质组学大师MPI的AndrejShevchenko实验室、伯明翰大学、ETH、宾州大学、斯坦福大学、PNNL、英国皇家学院、慕尼黑大学、剑桥大学、nanoESI发明人MannMathias实验室、UC戴维斯、波士顿大学、协和、生物物理所、中医药大学、大化所、蛋白质中心、出入境检验检疫中心、等等；跨国公司如Amgen、诺华、Roche、Merck、GSK、BMS、杜邦、等等。