近年来，小核酸药物研发的热度持续增高，其市场当下增速较快且具备极高的发展潜力。2022年，小核酸药物市场继续保持双位数增长，市场体量已从2018年的20亿美元扩充至如今的近40亿美元，几乎翻倍。从资本的角度来看，2022年国内外围绕小核酸药物进行的投融资事件共有21起，绝大多数项目的融资金额都达上亿元人民币。
纵观小核酸药物的历史，行业的飞速发展一定程度上依赖于递送技术的出现。由于核酸是携带负电荷的生物大分子，很难通过细胞膜的表面带负电荷的脂质双分子膜层，而且RNA容易被血浆和组织中RNase酶降解，被肝脏和肾脏快速清除和被免疫系统识别，进入细胞后“卡”在内吞小体中无法发挥功能。因此，能够克服系统循环、外渗、组织渗透、细胞摄取以及内涵体逃逸等重大挑战的递送平台是小核酸领域的“卡脖子”技术，也是小核酸药物获得成功的必要条件。
Alnylam、靶向药领域、医药行业整体在不同临床阶段的转化率
目前已开发出小核酸药物并实现成功上市的递送平台包括LNP（脂质纳米颗粒）平台与GalNAc共轭连接递送系统平台。然而这两种递送也存在缺陷，如LNP递送范围主要局限于肝脏和网状内皮系统（RES），且存在潜在的毒性；GalNAc偶联技术虽解决了LNP的免疫原性问题，但也存在肝靶向的局限性。
因此，现有递送技术的不足叠加极高的专利壁垒的限制下，目前业界纷纷对递送平台进行更新和尝试，既包括规避专利风险的基础上在LNP、GalNAc的分子基础上做成分和结构的更新，也包括采用新的共轭连接系统和脂质体纳米技术等新材料和新合成技术对小核酸药物进行开发，旨在进一步降低递送载体的副作用、实现器官和组织特异性靶向、提高细胞或组织靶向性、提高递送效率、创新给药方式、提供高效低成本合成制备方式，从而解决未满足的疾病治疗需求。
那么除了已经得到临床验证的LNP和GalNAc技术平台，近几年还会有哪些新型递送平台值得期待呢？以下将根据递送平台的类型（基于小分子配体偶联、纳米颗粒载体、抗体偶联、聚合物基质等），对未来几年即将迎来商业化拐点的递送技术平台[目前已开发出临床2期（或临床1/2期并已公布数据）及以上，但未上市的的小核酸药物]进行介绍。
递送平台类型1：基于小分子配体偶联
小分子配体偶联是指将GalNAc等小分子偶联至RNA，可经皮下或静脉注射系统给药，靶向能力强，可借助固有的受体介导内吞入胞。其中应用最为成熟的是GalNAc共轭连接递送系统，Alnylam至今已更新了3代GalNAc技术，其中前2.5代已分别用在了四款已上市产品中。全球范围内，研发管线中约三分之一的小核酸药物基于此技术。
GalNAc（N-乙酰半乳糖胺）可以识别并结合细胞表面蛋白去唾液酸蛋白受体（ASGPR），通过内吞将GalNAc从细胞表面运送到细胞质。ASGPR是一种在肝细胞特异性表达的内吞性受体，在其他细胞中几乎不表达，因此在递送范围上存在局限性，仅对于肝靶向有比较好的效果。
GalNAc-siRNA肝靶向递送技术原理
目前，除对GalNac的专利覆盖较为全面的Alnylam外，近年基于ASGPR/GalNAc递送原理的技术平台层出不穷，包括Dicerna的GalXC、Arrowhead的TRiM、Ionis的LICA等，也构建了与Alnylam的三触GalNAc结构存在显著区别的GalNAc递送系统，并且有部分产品已进入临床II期或III期，未来应用前景可观。
01企业：Dicerna递送平台名称：GalXC?特点：四环结构增强偶联物的稳定性临床进展：nedosiran用于治疗原发性高草酸尿已向美国FDA提交申请
Dicerna是一家专注于研发试验性RNAi治疗药物的生物医药公司，拥有能够实现肝脏靶向（GalXC?）和肝外靶向（GalXC-Plus?）的递送平台，在2021年该公司被诺和诺德以33亿美元高价收购。
肝脏靶向的GalXC?递送平台可实现RNAi疗法的皮下给药，该平台利用了GalNAc较高的肝脏选择性实现精准递送，并构建了不同于Alnylam的GalNAc四环结构，可增强偶联物的稳定性，同时还能准确定位多个GalNAc配体，将siRNA成功递送至肝细胞。目前，Dicerna进入临床阶段的产品Nedosiran（DCR-PHXC）、RG6346（DCR-HBVS）和Belcesiran（DCR-A1AT）均利用GalXC?技术开发而成。采用GalNXc递送体系临床进展最快的小核酸药物是nedosiran，这是唯一一款针对1/2/3型原发性高草酸尿症（PH）开发的RNAi候选药物，2021年8月，Dicerna宣布nedosiran关键临床试验PHYO2的积极top-line结果。已向美国FDA提交上市申请。02企业：Arrowhead递送平台名称：TRiM?特点：通过优化靶向化合物，实现组织特异性靶向临床进展：ARO-APOC3用于治疗ASCVD的3期试验预计将于今年结束
Arrowhead是一家旨在开发治疗顽固性疾病的新药物的生物制药公司，成立于1989年。该公司使用广泛的RNA化学组合和有效的递送模式，通过触发RNA干扰机制来诱导靶基因的快速、深度和持久的下调，抑制靶蛋白的产生。
公司在成功开发代表性递送平台TRiM?之前，曾开发两代DPC?递送平台（DPCpolymer+targetedsiRNA），虽因实验结果不理想而搁浅，但为后续的技术平台开发积累了宝贵的经验。基于过去十多年在靶向药物递送载体上的研发经验，Arrowhead构建了全新的递送平台TRiM?（TargetedRNAiMolecule），该平台去除了有问题的活性内体逃逸剂(PBAVE、MLP)，有利于靶向配体与目标受体的直接结合。
Alnylam是siRNA领域的龙头企业。一直深耕RNAi治疗领域，相继开发了多个递送平台，包括第二代脂质纳米粒子递送平台（DLin-MC3-DMA）和GalNac递送平台，均是RNAi药物递送领域的突破性技术。由于GalNac相比LNP递送系统具有显著优势，因此除了已获批的Patisiran使用了LNP，目前公司在研产品基本均使用GalNac偶联递送系统。为了进一步提高递送效率和安全性，公司也在持续更新迭代GalNac平台，从STC到ESC再到ESC+，不断完善小核酸药物开发技术。ESC是Alnylam的第二代GalNac递送平台，通过在反义链的5'端和正义链的3端包括另外四个PS键进行化学修饰，增强了药物的稳定性以及肝脏的靶向性，但其缺点是仍有可能在肝脏沉默其它非靶点基因，从而导致肝脏毒性，此现象称为siRNA脱靶效应。siRNA脱靶效应是导致GalNAc-siRNA偶联物肝毒性的主要原因。
为降低脱靶效应，基于ESC技术，Alnylam进一步在种子区域（seedregion）用乙二醇核酸（GNA）的(S)-异构体取代单个核苷酸来破坏配对的稳定性，使种子区域的核苷酸杂乱无章。结果显示，这种修饰可以显著减轻脱靶效应并减轻肝毒性，因为这些修饰以种子区特异性方式影响siRNA与不需要的靶mRNA的结合。目前应用ESC+GalNAC平台进展最快的药物是zilebesiran(ALN-AGT)、ALN-HBV02，均已进入2期临床。zilebesiran(ALN-AGT)是一种正在开发的用于治疗高血压的研究性RNAi疗法。ALN-HBV02是一种GalNAc-siRNA偶联物，旨在靶向乙型肝炎病毒（HBV），用于治疗慢性乙型和丁型肝炎病毒感染。关于ALN-HBV02安全性和抗病毒活性的研究显示，2次皮下注射VIR-2218治疗后，大多数患者在第12周达到最大HBsAg下降幅度，平均比基线HBsAg水平下降1.5log10。递送平台类型2：基于纳米颗粒载体
纳米颗粒是粒径在10-1000nm范围内的颗粒状分散体或固体颗粒。使用纳米颗粒进行递送可获得更高的跨细胞膜运输效率、良好的生物相容性。用作小核酸药物递送载体的纳米颗粒中最常见的是脂质纳米颗粒（LipidNanoParticle，LNP），这是一种化学合成的多成分脂质体制剂，封装核酸分子递送至靶组织，抵达作用部位前避免被核酸酶降解。
在Arbutus和Alnylam等公司的开发下，LNP递送系统共经历三次迭代，主要代表类型为DLin-DMA、DLin-MC3-DMA和L319。DLin-MC3-DMA开发后，LNP也首次应用在小核酸药物Onpattro?中并获批上市，使得当时LNP成为了最常用的RNA递送技术。为避免专利纠纷，三代LNP使用的LNP的区别主要在于阳离子脂质上。Alnylam的Patisiran的成功上市说明了LNP作为小核酸药物载体的可行性。然而可电离阳离子的毒性限制了其最大的给药剂量，并且使用其长期给药引起的副作用仍需要进一步观察。研发具有可降解、低毒性、器官特异性靶向等特质的新型纳米颗粒是未来的研发方向。
01企业：圣诺医药平台名称：多肽纳米颗粒（PNP）递送平台特点：可携带多个siRNA，通过协同效应提升治疗效力临床进展：双靶点siRNASTP750已进入临床II期研究
圣诺制药（Sirnaomics）成立于2007年，作为国内领先的RNAi公司，产品在中美两地同步研发，已经建立了较为丰富的研发管线，覆盖了肿瘤、纤维化等疾病领域。
公司专有的PNP(peptidenanoparticles)递送平台旨在解决脂质纳米颗粒(LNP)及传统GalNAcRNAi递送平台的瓶颈。PNP是由人工设计和合成的赖组氨酸多肽共聚物(HKP)构成，HKP是一种可促进siRNA活性成分递送的非活性成分，其包裹在siRNA周围，通过静电和氢键的相互作用缠绕siRNA，自我组装形成PNP。
PNP主要的优势：1）由于多肽及RNA的生物可降解性，PNP具有很高的安全性，并可通过局部或全身给药的方式将siRNA和mRNA递送至除肝脏外众多靶向器官。2）PNP支持同时携带多个不同靶向的siRNA，从而可以同时击倒两个不同的靶基因以产生协同效应，从而提升对抗疾病的治疗潜力。
目前圣诺使用PNP作为递送载体的管线遍布肿瘤，纤维化，医学美容等各个方面，其中进展最快的是STP705，这是一种TGF-β1和COX-2的双靶点siRNA药物，用于治疗原位鳞状细胞癌，目前已进入临床II期研究，并在2022年12月宣布其Ⅱb期临床试验获得积极中期数据。02企业：EnGeneIC平台名称：EDV(EnGeneICDreamVector)内源输送载体纳米细胞平台特点：毒性小，能刺激有效的抗肿瘤免疫反应，临床进展：TargomiRs已进入临床II期研究
03企业：Avidity平台名称：AOC（抗体寡核苷酸偶联药物）平台特点：结合了抗体的组织选择性，克服了递送障碍，临床进展：治疗DM1的AOC-1001已进入临床1/2期研究并公布数据
AvidityBiosciences是一家正在开创抗体寡核苷酸偶联药物（AOC）疗法治疗遗传性肌肉疾病的生物医药公司，总部位于美国加州拉荷亚市。公司是AOC技术的先驱，该抗体结合了单克隆抗体的组织选择性和基于寡核苷酸治疗方法的精确性，从而克服了阻碍寡核苷酸传递的障碍，可用于治疗罕见的肌肉疾病和其他严重疾病。
Avidity的AOC平台基于多年的内部工程构建，整合了寡核苷酸疗法、RNA加工修饰、抗体工程和偶联以及药物递送技术。该AOC平台的灵活性使得公司能够对各种类型的寡核苷酸进行递送，包括小干扰RNA（siRNA）和磷酰二胺吗啉代寡核苷酸（PMO），以不同方式修饰RNA功能，从而为不同疾病定制AOC疗法。基于专有的AOC平台，Avidity目前建立了专注于骨骼肌领域的产品管线，并希望拓展到其他细胞和组织领域，如免疫细胞和心脏组织等。目前治疗1型强直性营养不良(DM1)的AOC-1001进度最快，去年年底其公布了MARINA?试验的初步数据，有史以来首次成功地将RNA定向递送到肌肉中，这是RNA治疗领域的革命性进步。
聚合物基质通过静电相互作用与核酸结合并凝聚成小而紧密的结构。缩合的过程是由熵驱动的，当阳离子聚合物与核酸混合时，多聚物自发产生。借助聚合物基质保护RNA结构，可以实现实体瘤内药物递送，核内体逃逸效率高。目前在研企业主要为Silenseed公司。
04企业：Silenseed递送平台名称：LODER(LOcalDrugEluteR)递送平台特点：允许在肿瘤环境中siRNA缓慢、延长siRNA释放几个月临床进展：针对KRASG12D胰腺癌的siG12D-LODER处于临床Ⅱ期
Silenseed成立于1999年，位于以色列。公司凭借其专有的RNAi技术和LODER递送系统，可有效渗入并治疗恶性实体瘤，同时降低全身毒性。LODER基质是一种高分子量的聚乳酸共乙醇酸（PLGA）共聚物，其是直径为1nm，高度为5nm左右的圆柱体，作为一款siRNA递送系统，其能够通过移植肿瘤的方式，使siRNA药物直接到达肿瘤细胞，并且LODER还具有缓释能力，在保护siRNA免受环境中的核酸酶降解的同时能够使siRNA在肿瘤中缓慢释放达2月。目前Silenseed公司使用LODER递送系统在研有多款药物，其中核心产品是针对KRASG12D胰腺癌的siG12D-LODER，目前处于临床Ⅱ期阶段。
小结
经过近半个世纪的积累，递送技术逐渐成熟，并呈现出平台化的特点，使小核酸药物的开发进入了快速增长期。除了以上谈到的几种递送技术平台，外泌体、脂质纳米晶体（LNC）、脂质多聚复合物（LPP）等其他一些前沿递送技术平台也正在逐渐兴起，并已在临床阶段崭露头角，但还需大量的数据来验证其效力与安全性等。