1.通过基因毒性杂质警示结构结合网站查询判断
1.1通过警示结构判断见附件[1]
1.2通过ECHA、CEBS、日本职场安全网站等判断
1.2.1ECHA网站查询
（2）点击红框内容进入
（3）点击基因毒性信息--体内基因毒性
（4）查看结果：positive（有基因毒性），negative（无基因毒性）
1.2.2CEBS网站判断
（2）点击生物测定基因毒性结论（BioassayGenetoxConclusion）
（3）输入CAS号进行搜索
（4）查看结果（positiveornegative）
1.2.3日本厚生劳动省（职场安全网站）
直接搜索查看结果。
1.3CPDB数据库、PubChem数据库查询TD50、LD50计算限度
1.3.1CPDB网站查询TD50
（2）点击CPDB进入查看结果(TD50)
1.3.2美国国家药品图书馆网站中PubChem数据库查询LD50
（2）点击毒性（toxicity）进入
（3）查看毒性数据（给药方式、实验动物、半数致死量LD50）
2.世界卫生组织国际癌症研究机构致癌物清单、国际癌症中心最新的致癌物文件明确哪些具有致癌性。
二、基因毒性杂质限度计算方法
1.PDE（允许的日接触量）方法
PDE——允许的日暴露量
NOEL——无毒性反应剂量
体重调整假设任何成年人的体重为50kg（不论性别），如果专供儿童使用的处方中含有溶剂，针对较轻的体重进行调整或许是合适的。
计算公式：NOEL=LD50/2000
PDE=NOEL*50kg/（F1*F2*F3*F4*F5）
基因毒性杂质限度（ppm）=PDE/最大日服用剂量
举例：NEIPA（N-亚硝基二异丙胺）：CPDB数据库中未收载NEIPA的毒性数据，通过查询美国国家药品图书馆网站中PubChem数据库，得到NEIPA的大鼠经口给药LD50为1100mg/kg。计算：
NOEL（无可见影响水平）=LD50/2000=1100/2000=0.55mg/kg/天
PDE=0.55mg/kg/天*50kg/（5*10*10*10*1）=5.5μg/天（由于NOEL系由大鼠经口LD50计算而来，可知F1为5，F2为10，F3为10，F4为10，F5为1）
NEIPA（N-亚硝基二异丙胺）限度(ppm)=5.5μg/天/32mg*103≈170ppm（公司为更严格控制，控制限度为0.3ppm）
1.3由ppm计算相应NOEL、LOEL
有些时候我们查到的相应药理毒理研究数据（特别是某些低沸点溶剂）是研究空气中特定含量的吸入产生的效果，其单位常见的是ppm为体积比。通过查询毒性论文及数据库查询ppm，计算限度。
举例：由ppm计算相应LOEL—异丙基苯
F344大鼠以吸入途径暴露在异丙基苯浓度为250、500或1000ppm的空气中，6小时/天，5天/周，为期2年。在所有剂量水平，雄性动物鼻呼吸道上皮腺瘤、肾小管腺瘤或癌（组合）的发生率均增加。在所有剂量水平下，雌性动物鼻呼吸道上皮腺瘤发病率增加。
异丙基苯的分子量：120.19
LOEL为250ppm（未建立致癌作用的NOEL）
250×120.19/24.45=1229mg/m3=1.23mg/L，24.45为25℃气体摩尔体积。
对于持续给药=1.23×6×5/24/7=0.22mg/L
日摄入总量=0.22mgL-1×290L/天/0.425kg=150mg/kg/天
大鼠呼吸量：290L/天
大鼠体重：0.425kg
PDE=150×50/(5×10×1×10×10)=1.50mg/天
限度=1.5×1000/10=150ppm
举例：由ppm计算相应NOEL-三乙胺
三乙胺的分子量：101.19g/mol
NOEL为247ppm
247ppm=247×101.19/24.45=1022.2mg/m3=1.022mg/L，24.45为25℃气体摩尔体积。
对于持续给药=1.022×6×5/24/7=0.183mg/L
日摄入总量=0.183mgL-1×290L天-1/0.425kg=124.9mg/kg/天
PDE=124.9×50/(5×10×2×1×1)=62.5mg/天
限度=62.5×1000/10=6250ppm
1.4由TD50（半数中毒剂量）计算PDE
计算公式：
举例：环氧氯丙烷（具有基因突变的警示结构），控制限度如下计算：
大鼠实验TD50为2.96mg/kg/day
按照1/100000肿瘤发生率，TD50为1/50000的发生率
2.96mg/kg/day÷50000=0.0592μg/kg/day
0.0592μg/kg/day×50kg(体重)=2.96μg/人/day
即PDE为2.96μg/人/day
基因毒性限度（ppm）=2.96μg/人/day/0.03=98.67ppm≈100ppm
利伐沙班的每日最大服用剂量为30mg，那么环氧氯丙烷的控制限度为100ppm.
2.TTC（可接受风险的摄入量）法（依据:EMA《遗传毒性杂质限度指南》[4]）
基因毒性杂质限度（ppm）=TTC（μg/day）/MDD（最大日服用剂量）（g/day）
3.含有多个遗传毒性杂质的限度要求
基于TTC原理，当原料药中含有多个遗传毒性杂质时（3个及3个以上），按照表2所描述的进行限制。TTC根据治疗期进行判断。
计算公式：基因毒性杂质限度（ppm）=TTC（μg/day）/MDD（最大日服用剂量）（g/day）
4.1能在权威机构数据库中查找到TD50值的亚硝胺类杂质
AI=TD50（mg/kg/天）×50kg/50000
限度=AI/每日用药量
4.2未在权威机构数据库中查见TD50值的亚硝胺类杂质
(1)可以参考国际权威机构，如WHO、国际化学品安全性方案（InternationalProgrammeonChemicalSafety，IPCS）等公布的数据或建立的风险评估方法。
(2)与已有TD50值的亚硝胺类杂质结构相似，可以导用其TD50值计算杂质限度。
参考资料
[1]基因毒性杂质之警示结构（欧洲）文件（Developmentofstructuralalertsfortheinvivomicronucleusassayinrodents）
[2]关于在原料药工艺中生成亚硝胺类化合物的风险警示（CDE发布）
[3]人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH协调指导原则)Q3C(R7)：杂质：残留溶剂的指导原则
[5]人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH协调指导原则)M7：评估和控制药物中DNA反应性（致突变）杂质以限制潜在的致癌风险
[7]国家药监局药审中心关于发布《化学药物中亚硝胺类杂质研究技术指导原则（试行）》的通告（2020年第1号）