音叉，是呈“Y”形的钢质或铝合金发声器，可在敲击后振动发音。各种音叉可因其尺寸和叉臂长短、高矮的不同，而发出不同频率的纯音：叉臂越长，即音叉越高，波长越长，音调越“低”。叉臂越短，即音叉越矮，波长越短，音调越“高”。音叉中常见的纯音频率有：128，256，440，512，1024，2048Hz。
音叉放在靠近耳朵（约2CM）的地方测听，是气导测试（AC）；音叉放耳后的乳突或前额上测听，是骨导测试（BC）。测试听力时，常用的是C-256（256Hz）与C-512（512Hz）测试气导低频；C-2048（2048Hz）测试气导高频；骨导测试常用C-512（512Hz）。
临床上，医生将音叉敲击桌子或医生的肘部，让音叉发出声音，然后把音叉放在受试者耳朵口附近，或额头、耳朵后的骨头上，让受试者感受是否可以听到声音，然后把听到和听不到声音告知医生，医生根据受试者听到声音和听不到声音的情况，初步判断受试者的听力是否正常。如果有异常，初步判断听力下降是传导性听力下降，还是感音神经性听力下降。
音叉由英国乐师JohnShore在1711年发明，最初是用于作为参考的基音，来调节乐器的音准。然而，随着电子调音器的普及，现在已经很少使用音叉进行调音。如今在临床上，我们会使用音叉来作为常规听力检测的补充测试，会使用不同的方式完成音叉试验。而这些测试均以发明者的姓名命名。最著名的两个音叉测试分别是：Rinne测试，Weber测试。两种测试结果可分别显示不同的听损类型：
1、林纳试验（Rinnetest）
方法
结果分析
2)如音叉先放在外耳道口AC听不到声音后，立即移到乳突部，若BC尚能听到声音，则表示骨导比气导为长，即BC＞AC，称为RT阴性，记为为阴性(R-)，属传导性聋。
3)如乳突骨导听不见，移音叉臂于外耳道口也听不见，反之亦然，则示骨导与气导相等，即AC＝BC，二者相等可记为R±，属传导性聋。
注意RT假阴性：一侧重度感音性聋时，当测试患耳气导听不见，而骨导却听得见时，易误认为R(－)，其实是健侧“偷听”，即用大于健耳听阈10分贝的声音检查患耳骨导听力时，声波可从患耳以骨导方式经颅骨传导至对侧健耳，由健耳感音，故在此情况下，在健耳应加一气导噪音干扰，以防止假阴性出现。
所以理论上音叉测试气骨导差的结果，可以用来鉴定听力损失类型：
AC>BC：阳性，正常AC>BC但均较正常差：弱阳性，感音神经性聋AC=BC：轻度传导性聋AC 2、韦伯试验（Webertest） 又称骨导偏向试验，通过比较两耳骨导听力的强度强弱，判断耳聋的性质。关于传导性聋骨导听力偏向的原理，可能是由于外界声音不能通过患耳的传音结构进入内耳，干扰患耳的骨导听力所致。 1)将振动的音叉柄底紧压于颅骨中线的任何一点上（多为前额或颏部）； 2)由受试者受检者辨别那一侧耳听得响亮，若有偏向于哪一侧 1)若偏向自觉听力较好的一侧，表示对侧耳有感音神经性耳聋； 2)若偏向自觉听力较差的一侧，表示该侧耳有传音性聋； 3)若双耳听力正常或两耳听力损失性质和程度相似，则无偏向。 注意：韦伯测试适用于单侧性耳聋，或两侧同一性质耳聋。 3、施瓦巴赫试验（Schwabachtest） （1）将振动的音叉柄底部置于受试者乳突部鼓窦区，直至受试者听不到声音后立即移至检查者（或其他听力正常者）的同侧鼓窦区； （2）为了验证结果准确性，可颠倒检查者和受试者测试顺序； （3）前两个步骤结果一致，表示实验结果无误。分析结果。 结果 1)若受试者与正常听力者相似（±），表明受试者听力正常。 4、盖莱试验（Gelletest） 为镫骨活动试验，用于检查镫骨底板是否活动。先将振动的音叉置于受试耳乳突部，用波氏球或鼓气耳镜抵紧外耳道口加压。当向外耳道内加压时，骨导声音减弱，压力复原，则声音随之增大，说明镫骨可活动，为盖莱试验阳性(G+)；若骨导声音无变化，说明镫骨固定，为盖莱试验阴性(G-)。 （1）用波氏球或鼓气耳镜抵紧于外耳道口，注意不要漏气； （2）将振动的音叉柄底部置于受试者乳突部鼓窦区，同时向外耳道交替增加、减小压力； （3）记录受试者听音感受。 1)若受试者感受随外耳道压力变化一致的音叉声音强弱变化，为盖莱试验阳性(G+)，说明镫骨可活动； 2)若受试者听到的声音无强弱波动变化，为盖莱试验阴性(G-)，说明镫骨固定。 注意事项 （1）检查时需敲击叉臂的上1/3处，每次敲击应尽量保持用力一致 （2）检查气导时，音叉应距外耳道口约1cm，两臂的上1/3均应处于外耳道的延长线上 （3）检查骨导时要将叉炳端直接贴紧皮肤。注意测试时不要触及耳廓和头发 二、音叉试验注意事项 1)环境需安静。2)选择适当频率的音叉。3)按一定方法敲击音叉。4)试验时音叉放于正确部位。5)持音叉柄部不触及叉部，叉部不触及头发。6)对照耳必须正常，对照者之年龄要相当。7)防止听觉疲劳现象。8)注意林纳试验RT假阴性、弱阳性。9)WT韦伯测试适用于单侧性耳聋，或两侧同一性质耳聋。 三、音叉测试的有效性 音叉测试操作简单，又有大作用，可是，为什么没有被广泛应用于现代的临床听力检测呢？ 运用Rinne林纳测试，与传导性聋一样，虽然正常听力或感音神经性聋只有5%的错误鉴定，但这个测试却漏诊许多重度传导性聋的人们。（Browning,1987） 研究表明，运用Weber韦伯测试，大多数传导性聋的孩子的检测报告结果都是不准确的。 所以，由于音叉测试有明显缺陷，为了保证听力检查报告的准确性，临床上常常使用“听力计”为患者进行听力检测，而不是使用音叉。 用以上诸种方法测试的听力，其结果须进行综合分析，方能判断耳聋的性质。