2、验室艾滋病筛查实验室：23个检测点19个艾滋病病毒抗体快速检测技术手册主要内容第一章：人员要求第二章：检测点的设置、要求与管理第三章：试剂选择第四章：标本采集及使用本卷须知第五章：检测策略及流程第六章：实验记录第七章：结果报告与告知第八章：检测质量控制第九章：生物平安与个人防护第一章人员要求2021.9.人员要求1.1理论培训至少包括：在我国特别是本地区的流行状况与流行特征抗体快速检测理论根底及重要性。检测的种类与方法。样本类型、样本采集、贮存与运输。检测结果的判读、解释、实验记录、结果报告及保密、感染者转介与咨询。检测的质量控制。生物平安知识，个人防护，职业暴露预防与处理，废弃物处理
4、滋病流行情况和实际需求，可在有检测需求、但不具备建立实验室条件的地方设置检测点。2.1.2各级卫生行政部门负责组织检测点的审批，艾滋病确证实验室或筛查实验室负责培训、验收。2.2检测点要求2.2.1快速实验所在房间温度可控空调，保证室内温度到达快速检测试剂盒说明书要求的温度，有检测工作台，光线充足，可以消毒紫外灯。2.2.2需配备快速检测所需物品，至少包括：普通冰箱、消毒与污物处理设备高压灭菌器或消毒桶、一次性消耗品、平安防护用品和资料柜。2.2.3开展快速检测时，保证室内温度到达快速检测试剂盒说明书的要求。2.2.4严格按照快速检测试剂说明书要求操作，保存原始记录及实验结果不少于
5、十年！。2.2.5必须参加省或地、州市组织的快速检测能力验证。第二章检测点的设置、要求与管理2.3检测点管理艾滋病确证中心实验室负责本省快速检测的实施及其质量保证。2.3.1各省统筹考虑检测点的开展与规划，指导检测点的建立与理管2.3.2对已建立的检测点备案。2.3.3定期进展人员培训，必要时进展岗位再培训。第二章检测点的设置、要求与管理第二章检测点的设置、要求与管理2.3.4对本省使用的快速试剂质量进展评价。2.3.5不定期抽检快速试剂检测为阴性的样品，使用酶联试剂进展复检，发现漏检应及时处理，并上报国家参比实验室2.3.6组织本省快速检测能力验证活动。也可分级实施，由各地、州
10、的准备被采血者的准备采血者的准备工作混匀采血针头的处理针刺点的处理三、样品保存标本采集工作流程：生物平安1.穿白大褂；2.带无菌乳胶手套；3.原有创口要有保护：如创可贴。被采血者的准备1.询问有无出血史，2.坐姿；3.采血部位消毒；采血用具的准备1、皮肤消毒用品2、采血管及试管架、硬质废弃物容器等采血者的准备工作4.2样品采集样品应按试剂盒说明书的要求确定是采集末梢血或静脉血。采血时要注意平安，应用一次性采血针和一次性真空采血管，采血部位要严格消毒，慎重操作，防止刺伤皮肤和造成外界污染。4.2.1末梢全血通常为指尖血采集：消毒局部皮肤成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或
11、食指。用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液备用。第四章样本采集及使用本卷须知4.2.2静脉全血采集：消毒局部皮肤，用未加或加抗凝剂的真空采血管抽取适量静脉血备用4.2.3血清：将上述未加抗凝剂的真空采血管所收集到的静脉血，室温下自然放置12小时，待血液凝固、血块收缩后吸出血清，置于适宜的无菌保存管中备用。4.2.4血浆：将上述加抗凝剂的真空采血管所收集到的静脉血15003000转/分钟离心15分钟，上层即为血浆，吸出置于适宜的无菌保存管中，备用。注意：需要离心的样品在采集血样时最好不用玻璃质地的采血管！第四章样本采集及使用本卷须知4.3样品转运4.3.1不在现场检测
14、查室复查仍为阳性标本送确证室确认，阴性结果出据阴性报告并及时反响检测点。第五章检测策略及流程快速检测策略，根据检测点现场条件可分为以下二类5.1.1常规检测：5.1.1.1初筛试验，用敏感性高的快速检测试剂，结果为阴性，那么报告阴性；结果为阳性反响，那么进入复检试验。5.1.1.2复检试验，在同一检测点，用第一种快速试剂加上第二种快速试剂进展复检。两种快速试剂复检结果均为阴性，那么报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反响，那么按全国艾滋病检测技术标准要求送艾滋病确证实验室进展确证试验。5.1.1.3根据检测结果进展咨询，检测结果为阴性的按阴性咨询，对两种快速检测结果均为阳性反响或一阴一阳反响
15、的，按照疑似阳性咨询流程图5.1，建议尽快进展确证试验。样品初筛试验筛查试剂1阳性反应阴性反应复检试验快检试剂1+快检试剂2均阳性反应一阴一阳均阴性反应送确证室做确证试验报告阴性图5.1HIV抗体快速检测流程图按凝似阳性咨询告知按阴性咨询并告知第五章检测策略及流程5.1.2应急检测:在一些特殊情况下，如职业暴露、孕妇产时和手术前等，建议应用两种快速检测试剂同时检测，如两种试剂检测结果均为阴性，那么报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反响，那么按全国艾滋病检测技术标准要求送艾滋病确证实验室进展确证试验。同时，对检测结果为阴性的按阴性咨询，检测结果为一阴一阳或两种均为阳性反响的按照疑似阳性
16、咨询流程图5.2图5.2抗体快速检测流程图5.2当检测点上只有一种快速检测试剂时用该种快速检测试剂进展初筛试验，检测结果为阴性，那么报告阴性。检测结果为阳性反响，那么直接送样至艾滋病筛查实验室进展复检试验，见流程图5.3。筛查实验室按全国艾滋病检测技术标准要求的程序对样本进展检测与报告。一阴一阳均阴性反响按凝似阳性咨询告知送确证实验室做确证按阴性咨询并告知报告阴性两种快速检测试剂同时检测样品阳性反响样品初筛试验阳性反应阴性反应复检试验将样本转送筛查实验室均阳性反应一阴一阳均阴性反应送确证实验室做确证试验报告阴性5.3HIV按凝似阳性咨询告知按阴性咨询并告知抗体快速检测流程图图报告：
19、记到村、组；对家庭住址为城市的，要求具体登记到街道门牌号或工作单位。登记身份证号码或新农合号。对流动人群，应记录现住址和户籍，同时联系方式包括移动和座机号码也要一并记录第六章实验记录6.3样品数据资料主要有：样品送样单、样品报告备份？，阳性反响样品送上级实验室后确证实验反响结果报告单医院(检测点初筛阳性样品登记表。6.4质控数据主要有：快速检测标准操作程序，日常质控品检测结果、检测结果回报成绩。6.5试剂数据主要有：试剂收到日期，厂商名称，批号，有效期，保存条件记录等资料。第七章结果报告与告知检测结果的咨询和告知应由专人负责。7.1、检测后阴性结果咨询的程序和内容7.1.1核对求询者
21、行为改变可以得到的支持：了解求询者实施行为改变的社会支持条件，向求询者提供当地免费平安套发放点、清洁针具交换点、美沙酮维持治疗门诊和同伴小组活动的信息。7.1.6鼓励求询者促使其性伴同伴承受咨询和检测7.1.7提供必要转介效劳：根据求询者的情况，可将其转介至妇女安康中心、标准化性病门诊、美沙酮维持治疗门诊、针具交换点、心理咨询门诊等机构承受相应的诊疗和效劳。第七章结果报告与告知7.2、检测后阳性结果咨询的程序和内容7.2.1核对求询者的编号和结果，确保检测结果的准确性。7.2.2告知检测结果：对初筛阳性者咨询员解释初筛阳性结果的含义，解释进展抗体检测复查和确证试验的重要性，告知受检者获得确证结
25、章检测质量控制编号准确对应，防止错号和穿插污染。8.2.8判定结果时，质控带必须出现反响，实验才能成立。如实验完成后未呈现质控带，本次试验结果无效，样品须重检。8.2.9每个检测日，做一次外部质控品。以下情况下，需加做外部质控品：更换检测人员时；更换不同试剂批号时；更换不同试剂包装时；更换不同厂家试剂时。第八章检测质量控制快速检测室内质量控制按操作顺序可分为检测前，检测中和检测后质量控制，具体内容如下：8.1检测前质控8.1.1样品要求唯一编号，实验前仔细核对和检查。在有两人以上检测的情况下，防止错位。8.1.2检测点环境温湿度，应在试剂盒操作说明书要求的范围内，试剂和样品应按要求存放
26、，并做好记录。8.1.3检查是否有足够的试剂库存,确保试剂在有效期内，制止使用过期试剂。8.1.4每批实验如果使用不同批号的试剂，应做好记录，并对不同批次的试剂进展质控。第八章检测质量控制8.2检测过程质控8.2.1准备好试验区域，摆放必要器具。8.2.2记录样品编码、姓名、试剂名称及批号、操作者姓名等8.2.3核对样品编号，试剂条标记，检测记录，防止错号、重号和漏号。8.2.4收集并集中摆放全部待检样品，包括外部质控品。8.2.5按照试剂厂家提供的说明书开场操作。8.2.6需要在冰箱保存的试剂，从冷藏环境中取出后放置室温平衡后再使用。剩余的试剂条，应立即放入自封袋中密封28
27、保存。可以在室温条件下保存的试剂也应防止高温。8.2.7建议每次最多做10个样品，确保试纸条的编号与样本8.3检测后质控8.3.1判读实验结果时，应保证判读地点光线充足。对难以判读的条带，建议有2人判读。8.3.2复核样品编号并填写试验结果。8.3.3清洁并处理实验废弃物。8.3.4向负责人报告检测结果。8.3.5检查试剂库存量，根据实际需要，提前储藏足够试剂。第八章检测质量控制第八章检测质量控制8.3.6发现试剂出现以下问题，提示存在质量隐患，应详细记录：试剂的外包装盒或内容物已损伤；标签出现错误、缺失或字迹模糊特别是产品厂家名称，批号和货号，失效期或/和生产日期)；缺失目录或
29、应立即更换；如手套破损，应立即丢弃、洗手并换上新手套。手套破损，应立即丢弃、洗手并换上新手套。9.1.7防止用戴手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵、头发和清洁工作区域。9.1.8制止手套清洗或消毒后再次使用，因为使用外表活性剂清洗可使手套对水的通透性增加，消毒剂可以引起手套的破损。第九章生物平安与个人防护使用利器本卷须知1应尽量防止在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进展消毒。2应使用平安针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。3应将用过的锐器直接放入耐穿、防渗漏的利
30、器盒，用过的针头应直接放入巩固的容器内，消毒后废弃4制止将使用后的一次性针头重新套上针头套。制止用手直接接触使用过的针头、刀片等利器。9.2意外事故处理9.2.1如发生皮肤针刺伤或切割伤，应立即用肥皂和大量流水冲洗，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。9.2.2皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。9.2.3粘膜污染：用大量流水或生理盐水冲洗污染部位。发生上述事件后，通常应遵循三条原那么：及时处理原那么，报告原那么，保密原那么。第九章生物平安与个人防护9.3检测点的清洁和消毒9.3.1每次实验后，用0.5的次氯酸钠或75的酒精常规消毒
34、均为阴性反响，报告“抗体阴性，可排除感染。检测结果出现阳性反响一种为阴性反响一种为阳性反响或两种均呈阳性反响，不能排除感染，应继续追踪随访，至儿童满18个月时再次进展抗体检测。检测程序及结果报告检测程序及结果报告2婴儿满18个月时应再次进展抗体检测。使用两种不同原理或不同厂家筛查试剂进展抗体检测。两种筛查试剂的检测结果均为阴性反响，报告“抗体阴，可排除感染。检测出现阳性反响一种为阴性反响一种为阳性反响或两种均呈阳性反响，进一步进展确证试验，根据确证试验的结果判断是否感染18个月以下的婴幼儿的诊断感染的婴儿是所有患者中最脆弱的，两岁之前死亡率大于50，由于在怀孕期间母亲体内的抗体通过母婴传播到婴儿体内，因此很难作出诊断。所有阳性的母亲生出的婴儿，经过标准的抗体检测，例如或快速检测后，检测结果均为阳性。抗体检测直到婴儿1518个月才能确定，那时母亲传播的抗体水平已经降低到检测的极限之下。因此，对于小于18个月的婴儿，阳性诊断需要直接的病毒检测。因此，使用病毒学检测方法进展诊