国内首家:新型RNA原位测序技术发布!德运康瑞领跑单细胞与空间组学领域,临床潜力引关注

德运康瑞CEO李嘉成主持了本次发布会,并在开场致辞中表示德运康瑞作为国内少有的专注于全链条单细胞与空间多组学技术的公司,通过底层技术的不断创新,致力于打造具有国际竞争力的单细胞和空间多组学产品管线。本次在国内首次推出具有自主知识产权的新型RNA原位测序技术,为国内用户提供了一种亚细胞分辨率、高灵敏度、高特异性的空间组学技术手段。

原位测序技术最早在2013年由柯荣秦教授以第一作者身份发表在NatureMethods期刊,历时多年的技术发展和突破创新,在国内成功商业转化。本次发布由原位测序技术的发明人、德运康瑞副总经理柯荣秦教授为大家详细讲解了该技术的发展历程、原理特点和应用案例。

原位测序技术依赖于锁式探针和滚环扩增技术,它是以缺口靶向或条形码靶向为测序策略,同时引入边连接、边测序的化学原理,以滚环扩增产物为测序媒介进而在组织或细胞原位对RNA实现短片段测序的技术。通过4轮连续测序成像一次性最多可以检测出256种靶标mRNA分子。

柯荣秦教授表示,回国后对原位测序技术多项环节进行了完全的创新和突破,无需cDNA反转录操作,探针直接特异性靶向结合mRNA大大提高基因检出效率,对于低丰度表达基因的检测能力得到大幅提升和明显改善。此外对于探针的设计和测序成像过程都进行了重新设计,每个基因设计3~5对特异性结合探针,进一步提高了技术检出特异性和灵敏度,进一步拓宽该技术的应用范围和适用样本类型,鉴于目前技术的创新突破,我们称之为“新型RNA原位测序”技术。

新型RNA原位测序技术直接在组织和细胞原位上“点亮”基因表达信号,可以在单细胞甚至亚细胞水平分辨率分析基因表达分布规律,这也是目前已经商业化的空间转录组技术难以攻克的关卡。很多组织特定结构非常细微,在空间位置分布异常复杂或者狭长,甚至只有单层细胞或者几个细胞构成,尤为需要原位测序技术在空间位置上的超高清解析能力。第二个优势是原位测序技术可以100%全覆盖在10mm*10mm组织面积上解码出高达256种基因表达信息,相比现有国外的空间转录组技术,这样的“全景视野”不会遗漏任何组织特征结构或者重要组织病理区域,这从临床诊断应用角度来讲至关重要。

本次发布更是惊喜频频,基于新型原位测序的探针设计和实验原理,推出单分子RNA荧光原位杂交技术(asmFISH),一次性可以同时验证1~4个靶标分子的表达位置,同样具备高特异性和高灵敏等优点,是单细胞测序和空间组学后续验证的绝佳选择。该技术实验操作简单容易上手,公司也成功开发了SEERNAISHRNA荧光原位检测商业化试剂盒,针对不同研究需求进行探针定制,为广大科研工作者提供了高性价比的验证工具,也为个性化临床分子病理应用转化提供了可能。

SEERNAISHRNA荧光原位检测试剂盒

德运康瑞旗下先能生物技术总监王春明博士在本场发布会展示了小鼠嗅球16个基因的原位测序Demo数据结果,并与来自Allen脑图谱数据库中ISH结果进行比对,呈现出较好的一致性。此外,王博士详细讲述了首先面向国内提供一站式空间转录组技术服务流程细节。

最后各位主讲嘉宾现场精彩解答了在线听众诸多交流的问题。如您对新型RNA原位测序和单分子RNA荧光原位杂交技术有更多咨询,请扫描下方二维码进群交流,或者发送邮件到support@dynamic-biosystems.com;我们在线及时为您提供解答回复。

关于德运康瑞

苏州德运康瑞生物科技有限公司是一家单细胞与空间多组学技术平台型企业,围绕单细胞富集与检测、单细胞测序、空间多组学技术,满足不同应用场景下的分析需求,公司聚焦挖掘在肿瘤精准医学、优生优育、以及药物发现领域的巨大潜力,致力于推动精准医疗向单细胞与空间组学时代迈进,助力生命科学和临床医学,为人类健康事业贡献中国智慧。

关于先能生物

厦门先能生物科技有限公司目前国内少数专注于单分子RNA原位检测分析领域的新兴技术平台型企业,公司坚持前沿技术驱动,力图将所取得的重大技术成果和突破应用于基础生物学、转化医学及临床诊断领域中,建立起集产品开发和检测服务于一体的综合性科学平台。诚信专注、开拓革新,用心为客户提供高质可靠的产品服务。

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1.cfDNA(带UMI标签的fq数据WES)的生信处理call突变流程我们先来看看什么是UMI,这个UMI跟单细胞的UMI有什么不同呢? 单细胞空间测序的UMI 单细胞测序的步骤中增加了 UMI(unique molecular identifiers),UMIs 是由 4-10 个随机核苷酸组成的序列,在 mRNA 反转录后,进入到文库中,每一个 mRNA,随机连上一个 UMI,因此可以计数不同的 UMI,最终计数 mRNA 的数量。 https://www.jianshu.com/p/0e6520bdd1df
2.唯一分子标记(UMIs)确保测序的准确性细胞和分子生物学 临床 生殖健康 肿瘤学 遗传& 罕见疾病 药物 生物制药与制药应用 所有领域 通过灵长类动物了解人类自身的基因组 一种基于自然选择训练的新算法能够找出人类的致病变异 了解更多 工艺 测序 DNA测序 RNA测序 甲基化测序 文库制备 芯片 热门基因组学应用 基因分型 基因表达分析 表观遗传学 基因https://www.illumina.com.cn/techniques/sequencing/ngs-library-prep/multiplexing/unique-molecular-identifiers.html
3.CopyKAT单细胞测序umiUMI:单细胞测序过程中提高准确性的一种手段。唯一分子标记(UMI)是一种分子条形码,可以在测序过程中错误校正,提高准确性。这些分子条形码均为短序列,可特异性的标记样本文库中的每个分子。UMI可用于各种测序应用,许多是与DNA和cDNA的PCR重复相关的应用。RNA-seq基因表达分析和其他定量测序方法也可以采用UMI来去除重复。https://blog.csdn.net/weixin_52597377/article/details/136763412
4.生命科学单细胞测序(10×genomics技术)的原理是什么?百泰派克10x Genomics技术是一种革命性的单细胞测序方法,它可以在单细胞分辨率水平上获取基因组、转录组和表观组数据。这种技术的原理包括以下几个关键步骤: 1.单细胞悬浮液制备: 首先,将组织或细胞样本制备成单细胞悬浮液。这通常通过机械或酶处理来实现。 2.微滴封装: https://www.biotech-pack.com/qa42.html
5.单细胞+分子标签!Takara推出全新单细胞测序试剂盒测序中国目前,在单细胞测序方法中,UMIs已被广泛使用,但这些技术大多只能得到细胞中RNA 3’端信息,不能获得mRNA全长信息。以3’DE的方法获得的转录本结构变化信息有限。相反,全长mRNA分析数据却能揭示异构体、SNP、融合基因和其他等生物学相关特征。但是通常使用全长RNA-Seq的方法不添加UMI。而且想要保证文库产率、灵敏度和可https://www.shangyexinzhi.com/article/10935752.html
6.NatMethod丨校正UMI中的PCR扩增错误以生成测序分子的准确数量这篇文章的研究目的是纠正PCR扩增过程中在唯一分子标识符(Unique Molecular Identifiers, UMIs)中产生的误差,以生成准确的测序分子数量。 作者指出PCR错误是影响RNA分子绝对计数准确性的一个被低估的因素,尤其是在大规模和单细胞测序数据中。 图中描述了在测序过程中,由于PCR扩增和测序错误导致的UMI计数增加的情况: https://www.hanlab.net/newsinfo/7381297.html
7.公开课10xGenomics单细胞转录组测序全流程详解与实验设计10x Genomics Chromium系统通过每个微反应体系中含有的特定DNA标记序列(10x barcode和UMI )区分不同单细胞和转录本,可实现单细胞分辨率上的各类测序。近年来,基于10x 单细胞测序的高分文章发表数量逐年递增,且平均影响力因子超15分!真可谓是高分文章发表利器。 http://www.gene99.com/newsActDetail/3-1358.html
8.10xGenomics平台单细胞RNASeq测序详解6)价格优惠:相较于其他单细胞平台,如Fluidigm C1平台、Illumina BioRad Single CellSolution平台或传统手工扩增方法等,价格大幅优惠。 RNA-seq测序原理 基于10X Genomics 平台的高通量单细胞 RNA Seq技术是利用液滴法的原理,使用GemCode技术,通过控制微流体的进入,将带有 barcode、UMI(Unique Molecular Index,分子标签)https://www.magigen.com/h-nd-324.html
9.一种barcode微滴的单细胞测序方法与流程6.10x和bd技术不适用于微孔板芯片测序在血小板、外泌体、细菌、病毒或支原体等更微小微滴的单细胞测序。 7.目前单细胞测序耗材主要被10x和bd垄断,然而两者均基于barcode编码的磁珠体系,磁珠的最大缺陷是单个磁珠上结合的barcode数量有限,为达到有效的测序深度,其体积至少做到30um(barcode上限为106次/磁珠),而在微孔板https://www.xjishu.com/zhuanli/27/202210729616.html/
10.单细胞测序技术(singlecellsequencing)单细胞测序技术(single cell sequencing)是指在单个细胞水平上,对基因组、转录组、表观组进行高通量测序分析的一项新技术,它能够弥补传统高通量测序的局限性,揭示单个细胞的基因结构和基因表达状态,反映细胞间的异质性。2013年,单细胞测序技术被《Science》将其列为年度最值得关注的六大领域榜首;2015年再次登上Sciencehttp://www.zhongkeshengxin.com/doc_20056760.html
11.单细胞测序概述腾讯云开发者社区动物和植物细胞结构 单细胞测序(single cell sequencing),简称 scRNA-seq,顾名思义,就是能对单个细胞进行测序,提供了在单细胞水平观测基因表达的方法,可以更好地研究这些组织及其中存在的不同类型的细胞。将达到单细胞水平的分辨率。 二、为什么要做单细胞测序? https://cloud.tencent.com/developer/article/2139607
12.单细胞转录组测序–纯迅生物GEMs形成后,细胞在其中裂解,释放出mRNA,凝胶珠自动溶解释放大量barcode序列,利用PloyT引物捕获液滴中的mRNA。随后mRNA逆转录产生带有Barcode和UMI信息的cDNA,构建标准测序文库。 2.1 单细胞悬液制备 新鲜组织样本需要消化成单细胞悬液,对于培养的细胞或已经处于悬浮状态的细胞,需要对细胞洗涤以去除培养基。在进行单细胞https://www.chunxunbio.com/?page_id=153
13.盘点丨单细胞测序平台大集合!各自都具备何种优势?? 靶向基因检测,避免管家基因占用大量测序数据,节省测序和分析成本; ? 靶向定制通道,选定特定基因组合,提高UMI计数效率,罕见转录本检测阈值更低; ? 引入单细胞测序金标准,BD分子标签,降低非特异性表达; ? 完整cDNA可在磁珠微球结构保存长达16周,随用随取; http://www.singleseq.com/nd.jsp?id=1922
14.scRNAseq——为药物研发提供新思路凝胶珠溶解,细胞裂解释放mRNA,通过逆转录产生用于测序的带条形码和UMI信息的cDNA。液滴油层破碎,cDNA扩增,制备cDNA文库,然后使用Illumina测序平台对文库进行测序检测,即可获得大量单细胞的基因表达和免疫组库数据。 图7.10xGenomics平台流程图 (http://zhuanlan.zhihu.com/p/269461589)https://maimai.cn/article/detail?fid=1706712187&efid=HhIh1bt3G4wmIIxcpTH-Jw
15.BDRhapsody单细胞分析系统功能用途:单细胞的RNA-seq测序,基因表达分析。Onco-BC靶向检测,免疫反应检测,T-细胞靶向检测。 1、靶向基因检测,避免看家基因占用大量测序数据,节省测序和分析成本 2、靶向定制panel,选定特定基因组合,提高UMI计数效率,罕见转录本检测阈值更低。 3、引入单细胞测序金标准,BD分子标签,降低非特异性表达。 http://portal.smu.edu.cn/zxsys/info/1017/1570.htm
16.细数大规模单细胞转录组测序平台? 10x Chromium?单细胞检测原理 10x Chromium? Single Cell Gene Expression Solution中的Gel Bead中上长满了寡聚核苷酸链,包含Barcode和UMI、测序接头和Poly(dT)序列。在每个油滴内,凝胶珠溶解,细胞裂解释放mRNA,通过逆转录产生用于测序的带条形码的cDNA;液体油层破坏后,cDNA后续进行文库构建,使用Illumina测序平http://m.yunbios.net/cn/h-nd-841.html
17.温和细胞分选,开启单细胞测序成功的第一步!企业动态随着单细胞测序技术的快速发展,科研工作者们可对每个单细胞进行分析,认识到细胞间的异质性,深入了解如胚胎发育早期的分化特征、肿瘤微环境中的非均质性、罕见循环肿瘤细胞的转录组等等以往传统高通量测序方法难以攻克的领域。单细胞分析的应用已进入百花齐放的时代,涵括神经生物学、癌症、免疫学、微生物学、胚胎发育、临https://www.biomart.cn/news/16/2930094.htm