环介导等温扩增反应(LAMP)基因诊断技术及产品简介

TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术,其原理是带有T7RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子,被反转录酶的RNaseH活性水解形成单链RNA,然后与引物2退火,通过反转录合成双链DNA,在T7RN

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了唏嘘、质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显

等温多自配引发扩增(IMSA)即isothermalmultipleself-matching-initiatedamplification,是对目前核酸分子检测技术手段的改进和补充,具有简单、快速、高灵敏性高特异性的优势。IMSA最大特点就是,在等温核酸扩增过程中会产生多倍数的能自我配

新型冠状病毒SARS-CoV-2导致2019年冠状病毒病(COVID-19),如今正在全球肆虐。基于此,人类面临着一项重大的公共卫生挑战。快速检测现有的SARS-CoV-2感染和评估病毒传播至关重要。基于逆转录环介导等温扩增(reversetranscriptionloop-mediat

四川聚焦非洲猪瘟综合防控,依托四川大学等单位开展防控关键技术攻关,取得阶段性重要进展。一是早期诊断技术取得新突破。建立非洲猪瘟RPA快速诊断方法,研制非洲猪瘟病毒抗原高敏荧光检测试剂盒,其中,非洲猪瘟镧系荧光快速诊断检测方法及试剂盒达国际先进水平,试剂盒在四川省、国内多个省(市)和韩国推广应用,

近日,美国宾夕法尼亚大学(Upenn)的科学家们开发出了一种低成本的3D打印设备可以快速检测寨卡(Zika)病毒。据悉这个3D打印的检测装置只有一个苏打水罐大小,成本仅2美元,而且无需用电,也不用专业技术人员操作。患者只需提供一份唾液样本。当遗传分析检测到病毒存在时,装置中可变色的燃料将

《科学·转化医学》杂志近日载文称,美国科学家研制出一种快速、高灵敏且便宜的新型检测工具,不仅能直接检测到蚊子体内和人体体液中的寨卡病毒,还能区分寨卡病毒的非洲株和亚洲株,可更有效地追踪寨卡病毒的传播。寨卡病毒是一种虫媒传播病毒,与登革热、黄热病和西尼罗河病毒同属。寨卡病毒属于单链RNA病毒,

摘要:食品安全是全球面临的难题和巨大挑战,不仅影响着人们的健康与生活,还关系着社会的稳定。本文初步介绍了几种食品检测中微生物检验的新技术,希望为从事食品检验工作的人员提供帮助。《中华人民共和国食品安全法》中定义食品安全是指食品无毒、无害,符合应当有的营养要求,对人体健康不造成任何急性、亚急

在实际的产业化中,分子诊断仪器的通量往往至关重要。对于qPCR而言,由于引物设计的成熟和荧光通道的多样性,往往可以比较好的实现高通量检测。由于恒温核酸扩增技术引物设计较为困难,单一的反应温度会造成引物和模板,引物与引物之间的非特异性链接和扩增,使得恒温扩增的检测通量受到限制。但同时也得益于反应温

1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水

4月12日,记者从北京出入境检验检疫局获悉,由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收,技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍,新检测方法比老方法用时缩短一半,且检验成本较低,未来将在基层检疫机构和养殖场推广。新检测方法学名为环介导等温扩增法,是集

新冠病毒检测对于控制疾病传播、及早诊断治疗具有重要意义。荧光定量PCR由于高灵敏度和特异性成为了新冠病毒检测的金标准。由于设备昂贵、操作繁琐,荧光定量PCR技术很难用于现场即时检测。近些年来,也开发出了重组酶扩增(RPA)、环介导等温扩增(LAMP)、DNA纳米传感器等快速检测方法。然而假阳性问题制

记者昨天从北京出入境检验检疫局获悉,由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收,技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍,新检测方法比老方法用时缩短一半,且检验成本较低,未来将在基层检疫机构和养殖场推广。新检测方法学名为环介导等温扩增法,是集靶核酸扩

基因扩增技术—聚合酶链反应扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产

金黄色葡萄球菌属革兰氏阳性球菌,广泛分布于空气、水、土壤、饲料中,也存在于人、动物的体表、鼻咽喉及肠道,属于人兽共患病原菌。其中,金黄色葡萄球菌致病力最强,除引起皮肤组织及器官化脓炎症外,所产生的毒素污染食物,导致食物中毒。近年来,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件颇多。据美国疾控中心报道,由金黄色

国家“863计划”现代农业技术领域在动植物检疫性疫病的分子检测技术取得突破,开发出一批适用于口岸检疫和野外诊断的快速、特异、灵敏检测技术产品,研究成果获得2007年教育部科技进步一等奖。研制出动物水泡性疾病分子鉴别检测试剂盒,并进行了验证应用。该试剂盒适合于水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、猪水泡病病

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其

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1.求助crisprcas9引物设计软件动植物小木虫我知道有两个在线设计引物的软件,不知道是不是你要的 http://crispr.mit.edu/ http://www.e-crisp.org/E-CRISP/designcrispr.html 就算不是,我觉得你说的那个肯定也是在线设计引物的,不防把关键词在Google里 谢谢你的回复,我也知道有在线设计的软件,但选起来相对复杂,我看文献里他那个挺简单方便的,https://muchong.com/html/201511/9576640.html
2.如何正确设计引物?pcr引物设计详细步骤不需连接酶,不需长时间的反应。只要在设计引物的时候引入一段线性化载体两端的序列,然后将PCR产物和线性化的载体加入到含有BSA的In-Fusion酶溶液中,在室温下放置半个小时就可以进行转化了。这种方法特别适合大批量的转化。 14. 兼并引物 有时候,对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如,如果仅知道氨基酸序列,可以设https://www.magigen.com/how-to-design-pcr-primer.html
3.阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFNTALENCRISPR/Cas9基因敲除引物设计推荐选择靠近靶位点上游100bp和下游200bp处,或者上游200bp和下游100bp处,这样的好处是后面进行酶切分析的时候,对于阳性的克隆,可以很容易观察到2条分开的条带。 Taq酶,建议是用NEB的Fusion或者Q5,毕竟敲除本身很大可能也就是2-3个碱基的缺失,所以,高保证是必要的,防止产生假阳性的结果。 https://www.biodiscover.com/reaseach/116765.html
4.CRISPRCas9基因编辑2gRNA设计(下)3. 设计检测所需引物 这里检测所用的引物和平时做PCR检测mRNA表达的引物是不同的,这里的PCR产物必须覆盖基因编辑的位置,且产物要足够长,至少500 bp。在这里我们以P53为例子: (1)找到包括sgRNA序列的前后1000个碱基的序列(2000 bp) image.png (2)将找到的序列复制粘贴到blast中https://www.ncbi.nlm.nih.gov/https://www.jianshu.com/p/0a3ffd23bdff
5.GeneiousPrime2022破解版GeneiousPrime2023.1w在一个界面中执行各种克隆和引物设计操作。自动注释质粒图谱和表达载体。模拟各种分子克隆操作,包括限制性克隆,Gibson组装,Gateway克隆和TOPO克隆。设计和测试引物,找到CRISPR位点,并优化密码子。 3、数据管理 只需拖放即可以通用文件格式(包括Genbank,SnapGene,FASTQ,FASTA,BAM,VCF,GFF)导入,导出和转换序列,注释和注释,http://www.sd173.com/soft/9265.html
6.想筛就筛,CRISPR文库一站式服务低至2.4w,立省2w!CRISPR文库能够在全基因组范围内进行筛选,可以高效地研究基因功能以及发现靶点。然而,CRISPR文库筛选整个工作流程涉及多个步骤与实验,对于新手小白来说,无疑是个巨大的挑战。 源井CRISPR-iScreen?一站式筛选服务¥2.4w起,最高立省2w+;还有400+文库https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzU3MTE3MjUyOA==&mid=2247673607&idx=2&sn=cd6115639a78cbc3e3b668999f0f5010&chksm=fd9c5f6e5c10b141d5fa7b8d9cc9fd6fc8ef6418ee733a86213ea3c4b0b578606854f2cd3699&scene=27
7.CRISPR1. 目的基因sgRNA设计 ” 目前设计sgRNA的网站比较多,张锋老师实验组总结了sgRNA设计工具如:https://zlab.bio/guide-design-resources,其中synthego(https://www.synthego.com/products/bioinformatics/crispr-design-tool)是小编比较喜欢用的设计工具。不过该网站只能设计人、果蝇和小鼠基因的sgRNA。以人的基因TP53为例http://www.dentalearner.com/archives/3855
8.质粒构建软件中的CRISPR设计功能,助力精准基因编辑2.CRISPR设计:质粒构建软件中的CRISPR设计功能可以根据用户输入的目标基因信息,自动设计出符合特异性、GC含量均衡等原则的gRNA序列。此外,软件还能模拟基因编辑过程,预测可能的编辑结果,帮助科研人员在实验前优化实验设计。 3.引物设计:质粒构建软件通常还提供引物设计功能,以支持PCR扩增等实验操作。软件能够根据用户输入的https://www.yanyin.tech/cms/lBoB1pz4.html
9.CRISPRPrimerDesignerv1.1.2x64primerblast报错nohash资源CRISPR primer designer 本地化运行的单机版基因编辑引物设计软件、提高基因编辑特异性、自动分析Blast比对结果,直接生成最终引物,内置拟南芥和水稻基因组序列,自定义基因组后也可支持人、小鼠、果蝇、斑马鱼等多个物种的基因编辑引物设计。 简易使用教程:第一步:把基因的 CDS 序列(注意是编码区序列)贴到框里,勾选 https://download.csdn.net/download/zhouthrone/12097004
10.标签蛋白纯化:原核表达载体构建方法详解企业动态如若扩增片段序列,需要在上游引物加上起始密码子,在下游引物加上终止密码子。常见的起始密码子为ATG,终止密码子通常为TGA,TAA,TAG。若载体上无标签,构建载体时可在上游引物前端或下游引物后端添加标签序列,这样即可把标签添加到序列的N端或C端。 引物设计的原则: https://www.biomart.cn/news/16/3011549.htm
11.RPA引物设计深圳易致生物科技有限公司,基于DNA/RNA快速扩增技术,设计、研发与转化病原微生物快速检测产品。拳头产品:超敏胰岛素ELISA试剂盒,支原体检测试纸条,支原体清除剂,支原体预防剂,恒温PCR,CRISPR,Cas12a, Cas13ahttps://ezassay.com/primer
12.CRISPR/Cas9载体设计与构建的作用机理CRISPR/Cas9 (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/ CRISPR-associated protein 9) 技术是最近发现的一种基因组靶向修饰技术。与之前的技术相比,CRISPR/Cas9技术是通过一段RNA来识别靶位点,因而在设计和构建上更加简单。迄今为止,CRISPR/Cas9技术已成功应用于肺炎链球菌Streptococcus pneumoniae、大肠杆菌https://www.chemicalbook.com/NewsInfo_5909.htm
13.Cas9基因敲除大肠杆菌BL21菌种中的lacZ基因通过CRISPR/Cas9编辑β--半乳糖苷酶基因,造成β-半乳糖苷酶基因功能缺失,编辑后的BL21菌种将不能代谢X-gal产生蓝斑。 实验材料 大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒(英茂盛业,CR3011) Clone Direct PCR Mix(英茂盛业,P3001) 靶点和实验方案设计 根据BL21中β-半乳糖苷酶基因序列,设计基因敲除靶点和重组修复模板。 设计https://www.inovogen.com/geneknockout/support/2016/1230/441.html
14.chopchop指南:CRISPR设计在设计CRISPR时,我通常会使用两个网站:CRISPOR和chopchop。对于同一个基因或位点,我会分别用这两个网站进行设计,然后比较结果,这样更保险。不同的网站可能采用不同的计算规则,即使针对同一种排序标准(如效率或特异性),不同的gRNA排序也会有所不同。虽然我并没有专门研究过这些规则,但可以确定的是,CRISPOR和chopchhttps://mbd.baidu.com/newspage/data/dtlandingsuper?nid=dt_5580256992045595413
15.MeRIPqPCR方法原理结果含义展示方法及应用细谈3.MeRIP-qPCR引物如何设计? 由于目的是定量位点的修饰水平,因此MeRIP-qPCR的引物不仅是针对目标基因,还要是针对其上的那个修饰位点(区域)。这个位点信息可以从: (1)MeRIP-seq的测序结果中筛选得来 通常是一段位置坐标,比如云序生物提供的MeRIP-seq结果,某个甲基化峰位置如:chr1:111234-111567。有了这个位置信息,可https://www.bio-equip.com/showarticle.asp?ID=453117433
16.列出给出序列的crispr引物OAmaque列出给出序列的crispr 引物 手动寻找cripsr 引物比较麻烦,而现在有些网站可以完成这一任务,但是,用python 去实现它也很简单。以下是脚本: 1#!/usr/bin/python2#list all crispr-target(20 bp + NGG)34importre5fromBio.Seqimportreverse_complement # use Biopython module67genome_seq = open("seq.txt")8https://www.cnblogs.com/OA-maque/p/4808859.html
17.一种高效无选择标记的黑曲霉基因组编辑方法隐藏缩略图 本文结构 摘要 关键词 Abstract Keywords 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株和培养基 1.1.2 主要试剂 1.1.3 引物 1.2 方法 1.2.1 CRISPR/Cas9质粒的构建 1.2.2 多靶位点sgRNA表达盒及供体DNA片段的设计 1.2.3 原生质体转化及转化子筛选 1.2.4 靶向质粒的丢失 2 结果与分析 2.1 CRISPR/Cas9https://cjb.ijournals.cn/html/cjbcn/2022/12/gc22124744.htm
18.科学网—Microbiome:华中农大谢卡斌组利用CRISPR系统改进16SrRNAPCR钳(oligo),最初设计用于在PCR期间抑制特定等位基因的扩增,从而能够显著减轻16S-seq中宿主16S rRNA基因的污染。PCR钳利用肽核酸(PNA)和锁定核酸(LNA)寡核苷酸来阻止PCR延伸或引物结合靶标DNA。少数宿主特异性PNA和LNA的寡核苷酸被设计用来特异性抑制质体和线粒体16S rRNA基因的扩增。然而,最近的一项研究发现,PNA寡https://wap.sciencenet.cn/home.php?mod=space&uid=3334560&do=blog&id=1237160