干货蛋白质印迹(WB)成功指南下载细胞抗体特异性

蛋白质印迹法也称作免疫印迹法,是一种广泛应用并公认的技术,用于检测细胞或组织提取物中的蛋白表达水平。这项技术通过抗体与特异性目的蛋白结合,测量生物样品中的蛋白质水平。抗体与其靶标蛋白表位之间发生的精确结合作用允许检测蛋白质内部高度特异的氨基酸序列。抗体也可检测蛋白质上的特异性翻译后修饰(PTM)。磷酸化特异性抗体已用于鉴定特定信号通路中的靶标以及用于研究各种生物学背景下磷酸化过程的改变。最近出现了针对其他类型PTM的特异性抗体,从而允许研究人员监测蛋白质的乙酰化、甲基化或泛素化状态改变。

本指南将着重介绍蛋白质印迹实验方法中的关键步骤,并展示实验步骤的改变可能对您的实验结果产生的影响。我们还将讨论在您的蛋白质印迹实验中使用已充分验证抗体的重要性。最后,我们将为您展示CST科学家们使用的且与我公司抗体搭配使用表现最佳的常用试剂清单。

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1.美国Biorad伯乐Trans型号 Trans-BlotTurbo 产品说明: Trans-Blot Turbo转印系统好结合了传统转印技术与现代印迹膜和滤纸合,可在Z短的时间内完成蛋白质从凝胶到膜的转印,兼操作非常简便。系统内置了高电流电源,可直接控制钛阳极和不锈钢阴极间的电流,能在3分钟内实现快速转印。全套系统采取即用型设计,研究人员可更快,更轻松的获得结果,https://b2b.baidu.com/land?id=87484878ca0e8780b978edc7159ab72110
2.Western Blot显色篇简介技术专栏技术专栏Invitrogen的Pre-Q western blot stain kit,是用AP的荧光底物DDAO来显色的,检测灵敏度达到2ng,堪比一般的化学发光检测试剂盒。这个荧光底物的好处在于,经过AP分解后得到的红色荧光产物是稳定的,不会因为底物用完而消退,不需要暗房或者压片,干噪后的膜上更明显,在紫外或者扫描仪上可随时检测。AP的还有一种用于荧光http://www.biofly.cn/view.asp?id=44
3.五年的westernblot经验总结(附abcam的wb的protocol).doc在这五年的western blot实验历程里,我先后用过进口抗体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。 进口抗体一般不会出现闪失:abcam品种全,质量过硬,但价高(3400元/100微升),而且说是100微升,但至多能吸出来90微升;Sigma的价最贵;比较有性价比的是CST的抗体,现在好像是2200元/100微升,我前后用过二十几种, https://max.book118.com/html/2017/0405/98833797.shtm
4.胰岛分离与纯化技术胰岛细胞。因此,早在20世纪60年代就已经开始了 小动物胰岛分离方法的探索,Hellerstrom等曾直接 从有高血糖的肥胖小鼠分离胰岛用于检测酶活性,后 来用同样的方法分离正常小鼠、大鼠和豚鼠的胰岛。 由于胰岛散在分布于胰腺的外分泌组织中,并与周 围组织紧密连接,胰岛的分离过程实际上是将其从富 https://www.360doc.cn/document/10579938_539647281.html
5.揭秘质粒转染试剂使用秘籍,效果超乎想象!由于实验室经常做质粒转染实验,接触到的质粒转染试剂也不少,有国际权威品牌赛默飞的Lipofectamine2000和Lipofectamine3000、国内上海星启的Starvio质粒DNA转染试剂,还有碧云天的lipo8000等等。但各家试剂的成分、转染性能等方面还是存在一定差异。赛默飞的质粒转染试剂主要以阳离子脂质体成分为主,而上海星启的Starvio则以可https://zhuanlan.zhihu.com/p/11539287862
6.制备环形RNA的构建体方法及其用途与流程[0150]对于翻译产物是gfp的情况,通过在显微镜下观察荧光,用ripa裂解液(碧云天)裂解细胞,然后通过westernblot检测蛋白表达。确定通过本发明的方法获得了gfp的表达(图8a)。[0151]对于翻译产物是萤光素酶的情况,先用passive裂解液(promega)裂解细胞,然后用荧光素酶检测试剂盒(promega)通过酶标仪检测蛋白表达。确定通过本http://mip.xjishu.com/zhuanli/27/202110594352.html
7.腺病毒之家腺病毒专题讨论帖!核酸基因技术1. 表达shRNA、microRNA重组腺病毒鉴定与后续试验2. 磷酸钙转染3. RT-PCR和Western blot鉴定腺病毒4. 腺病毒知识(附件)Page 25: civcul 最后编辑于 2011-11-22浏览24.2万 回复54582 腺病毒包装/AdV/重组腺病毒包装 全部讨论(1514) 默认最新 lynnda civcul老师,我在做腺病毒载体的时候遇到一个问题,双片段https://3g.dxy.cn/bbs/topic/35510827
8.polysciences,cargille,AffinityImmuno产品信息主页Westernblot检测滴度为1:5,000。与其他物种BLC的交叉反应尚未确定。纯化兔抗人嗜酸细胞趋化因子目录号:TP-214规格:纯化兔免疫球蛋白,0.5毫克产品描述和用途:仅供研究使用。这种与重组和天然人嗜酸细胞趋化因子反应的多克隆抗体是使用大肠杆菌表达的成熟人嗜酸细胞趋化因子的氨基酸1-74作为免疫原产生的。Westernblot检测http://www.hardwareinfo.cn/hardware/product-125089
9.自噬学习开端自噬从入门到精通4) 利用Western Blot检测p62蛋白来评价自噬以及自噬流的强弱:起初自噬所降解的底物被认为是随机的,但是后来的研究表明有些蛋白是选择性降解的,在这些蛋白之中研究的最为透彻的是p62蛋白,p62蛋白水平的多少与自噬流的强弱有着反比例关系。 5)MDC或者Cyto-ID染色:包括自噬体,所有酸性液泡都被染色,故属于非特异性的。https://www.jianshu.com/p/02f8177e54b7
10.转基因克隆动物9篇(全文)Western-blot分析显示, 该融合蛋白能被带His标签的单克隆抗体特异性识别, 表明在Rosetta (DE3) 大肠杆菌中表达的p ET-28a-Apo B100重组蛋白为目的蛋白, 目的蛋白复性后免疫白兔, 用间接ELISA法检出高效价多克隆抗体, 这为后续试验研究提供了重要前提, 也为进一步研究Apo B在肝脏脂肪代谢中的功能奠定了基础。https://www.99xueshu.com/w/ikey1cxrjisc.html